Molekula Diagnostics: realtempa PCR

Nuntempe, molekula diagnozo mekanismo desegnita PĈR (PCR), kiu estis la impeto por la evoluo de granda nombro da metodoj de diagnozo de malsanoj, surbaze de la prijuĝo de genetika materialo. Por efektivigi realtempan PCR uzante gene fragmento (precipe la acidaj nucleicos) de la agento causante, kiu ne troviĝas en aliaj individuoj.

La principo de PCR estas la multipliko de certa patógeno DNA fragmento milionoj da fojoj por ADN polimerasa en speciala unuo, nomata kiel la termika cycler, kiu provizas cikla ripeto de la temperaturo reĝimo por donita programo.

Diagnostics PCR permesas ripeti serion de amplificaciones, subtenante la enzimo aktiveco. Kiam la amplificación okazas glate, en unu ciklo la nombron de kopioj de aparta peco de DNA de la patógeno duobloj, post tridek cikloj - cent dek. Tial PCR estas uzita en diagnozo por determini malgranda sufiĉa patogenoj, la identigo de kiuj estas neebla sen ĝi.

Ni notu, ke la ARN ne povas esti ŝablono por PCR en reala tempo. Tial, la celo de detekti virales ARN antaŭ la amplificación por akiri DNA rilatas al la responda fragmento de ĝi. La PĈR permesas produkti DNA kaj RNA mezurado patógeno. La informo tial ricevis estas uzita por monitori la efikecon de terapio uzita, kaj la taksado de la klinikaj prognozo.

Krome, realtempa PCR ne postulas aldonan agojn rilate al la malĉifro de la cela DNA aŭ amplicons, kiu servas kiel baron al la ĝusta diagnozo kaj kondukas al falsa rezulto. Tiu aliro ebligas ne uzi la elektroforezo paŝo, kondukanta al risko-redukto produktoj de la PĈR. Ankaŭ, pro la malpliigo de la nombro de manipuladoj kun la agento, ĝi reduktas la tempon de la enketo, simplifica la procezo, ĝi reduktas la verŝajneco de eraroj. PCR ankaŭ permesas vin specifi la komenca numero de kopioj de la DNA de la patógeno en provo clínico por helpi identigi periodoj de exacerbations kaj preni akurata aranĝojn por kuraci la pacienton.

Hodiaŭ, ekzistas grandan nombron de amplificación metodoj de fijación en reala tempo. La plej kutime uzata diversajn teknikojn aplikante amplicon rilatas al fluorogenic sondas, la radiado intenso de kiuj varias dependi de la amasiĝo de amplicon kaj registrita en reala tempo per speciala aparato nomiĝas thermocycler kun optika modulo. Ĝi provizas altan nivelon de sentiveco de la analizo. Je la sama PCR produktoj povas esti detektita, kune kun granda kvanto de kromproduktoj, en tempo, kiam uzante elektroforezo ĝin en iuj kazoj ne rimarkis.

Por PCR uzante pozitiva kaj negativa kontrolo specimenojn en reala tempo. Tiel, pozitiva kaj negativa specimenojn en studo analizis kiel apartaj specimenoj, la kontrolo specimeno kiu estas enkondukita en ĉiu tia specimeno kaj pasas ĉiu analizo paŝoj.

Hodiaŭ, ekzistas granda kvanto de aparatoj por efektivigi la PĈR. Ĉi tiuj inkluzivas: Bio-Rad, Aplikataj Biosystems, Cepheid kaj Roche. Ĉiu el ili havas avantaĝojn kaj malavantaĝojn

Ni notu, ke la PCR - metodo de diagnozo uzita en grandskala scienca, esplorado kaj diagnozaj centroj ĉirkaŭ la mondo, ĉar ĝi donas la ŝancon por realigi tujan interpreto de la rezultoj.